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高效液相色谱法分析中国人参不同部位中多酚类化合物

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作为中国民族品牌的“长白山人参”,在2011年已成为注册商标,同时被列为地理标志产品。此外,吉林省已将“长白山人参”区域公用品牌作为实施品牌发展战略的重点工作之一。2012年我国批准种植的人参为新资源食品后,人参的应用也由单一的中药材拓展到食品、饮料及保健产品等多个领域,为我国人参产业的跨越式发展提供了新契机。

现代医学研究证明,人参具有多种生物学和药理特性,如免疫刺激、抗癌、止吐、抗氧化等。这些特性与人参中的化学成分密切相关,如人参皂苷、人参多糖、生物碱、游离氨基酸、多酚以及柠檬烯等挥发性化合物。其中多酚类化合物是植物的次生代谢产物,大部分由苯丙氨酸衍生而来,少部分由酪氨酸衍生而来。按其结构不同可分为类黄酮、木聚素、酚酸和木酚素。然而,与人参皂苷相比,人们对人参中多酚类化合物的了解相对较少。

因此,吉林大学食品科学与工程学院的徐艳阳、赵玉娟和陈艳*等人以长白山人参为研究对象,应用高效液相色谱系统分析红参根、生晒参根、人参茎、人参叶、人参花和人参须中的多酚类化合物含量和种类,以期为长白山人参的深加工和综合开发利用提供一定的理论依据。

1 人参各部位中总多酚含量的测定

没食子酸标准曲线的回归方程为Y=0.011 7X+0.034 9(R2=0.999 6),由回归系数可知,没食子酸质量浓度在0~50 µg/mL范围内线性关系良好,可以用于样品总多酚含量的测定。如图1所示,人参叶中总多酚的含量显著高于其他部位(P<0.05),为红参根中总多酚含量的3.7 倍(P<0.05)。人参茎和人参花中总多酚的含量接近,但显著高于红参根、生晒参根和人参须,分别是红参根的2.5 倍,生晒参根、人参须的1.8 倍(P<0.05)。

2 多酚标准品溶液和人参样品的高效液相色谱检测

从图2可以看出,在色谱条件1.3.3.2节下,18 种多酚类化合物的标准品得到较好分离,人参各部位溶液的色谱图中目标峰的保留时间与多酚单体标准品的色谱峰一致。在此色谱条件下,红参根、生晒参根、人参茎、人参叶、人参花和人参须中18 种多酚类化合物得到较好分离。因此,根据每种多酚单体的保留时间和紫外吸收光谱的特征吸收波长对人参样品中18 种多酚单体分别进行定性。

3 方法学验证

3.1 标准曲线

由回归系数(R2>0.980 7)可知,18 种多酚类化合物质量浓度在5~30 μg/mL范围内线性关系良好。

3.2 重复性、精密度及稳定性实验结果

结果显示,1 8 种多酚类化合物的R S D 为0.25%~3.49%,均小于5%,表明该测定方法重复性良好。18 种多酚类化合物峰面积的RSD为0.52%~3.02%,均小于5%,表明测定方法的精密度良好。18 种多酚类化合物峰面积的RSD为0.52%~2.58%,均小于3%,表明18 种多酚在测定时间8 h内稳定性良好。

3.3 回收率实验结果

结果显示,18 种多酚类化合物的加标回收率在84%~99%之间,RSD均小于5%,表明本实验方法有较好的回收率,结果准确可靠。

4 人参不同部位中多酚类化合物含量的测定

结果显示,不同部位的人参样品中,18 种多酚类化合物中均以麦芽酚含量最高(P<0.05),其次是儿茶素。人参花和人参须中的总酚酸含量高于人参叶、人参茎(P<0.05),红参根、生晒参根中的总酚酸含量较低。人参花中的总黄酮含量高于红参根、生晒参根(P<0.05),人参茎、人参叶、人参须中的总黄酮含量较低。另外,红参根中的麦芽酚、儿茶素和原儿茶酸含量较高,分别为0.976 3、0.499 6、0.194 2 mg/g。生晒参根中麦芽酚的含量最高,其次为儿茶素、龙胆酸。红参根中未测到阿魏酸,我国生晒参根中阿魏酸含量低于测定的干白参根。这可能与多酚类化合物的提取方法和人参的种类、生长环境等有关。人参茎中的麦芽酚含量最高(P<0.05),其次儿茶素含量较高。人参叶中主要以麦芽酚、儿茶素、原儿茶酸为主。人参花中主要多酚类化合物为麦芽酚、儿茶素、原儿茶酸以及对羟基苯甲酸,其中对羟基苯甲酸占18 种多酚化合物含量总和的46.08%。人参须中麦芽酚、龙胆酸、柚皮苷、丁香酸、儿茶素和原儿茶酸含量丰富。

本实验和其他文献中关于人参中总多酚及总皂苷含量的测定结果显示,人参中总多酚及总皂苷的含量不同,这与人参的种类、生长年限、水分含量、提取方法、测定方法和环境等因素有关。

结 论

本实验应用Folin-Ciocalteus比色法对长白山人参不同部位中总多酚的含量进行测定,结果表明红参根、生晒参根、人参茎、人参叶、人参花、人参须中的总多酚含量依次为(69.47f 3.25)、(95.04f 5.03)、(1 7 5.1 9 f 3.2 6)、(2 5 6.9 1 f 2.8 1)、(174.40f 6.26)、(99.31f 2.90)mg/100 g。其中人参叶中总多酚含量最高,其次为人参茎、花,红参根、生晒参根、人参须中的总多酚含量较低。

本实验建立一种同时测定长白山人参各部位中原儿茶酸、绿原酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、龙胆酸、对香豆酸、阿魏酸、间香豆酸、柚皮苷、甲基香兰素、邻香豆酸、白藜芦醇、肉桂酸、麦芽酚、儿茶素、柚皮素、芒柄花黄素和橙皮素18 种多酚化合物含量的高效液相色谱分析方法,各成分的峰形和分离度较好,保留时间稳定。以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,18 种多酚化合物的出峰时间均在35 min内,且与相邻峰的分离度良好。18 种多酚化合物在波长230 nm处有较大的吸收,且色谱图的基线较为平稳。18 种多酚类化合物在长白山人参的各部位中,麦芽酚含量最高(P<0.05),其次为儿茶素。人参花中的总酚酸含量高于人参叶和人参根(P<0.05);人参根中的总黄酮含量高于人参叶(P<0.05)。该方法准确性高、重复性好,可为有效控制人参多酚的质量提供依据。

本文《高效液相色谱法分析中国人参不同部位中多酚类化合物》来源于《食品科学》2021年42卷4期240-246页,作者:徐艳阳,赵玉娟,高峰,王二雷,鲁海玲,李雪凤,姜雯雯,陈艳。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20200214-140。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。

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修改/编辑:袁月;责任编辑:张睿梅

图片来源于文章原文及摄图网

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