了解乙肝结构特点，掌握HBV复制周期，是开发新靶点的基础

乙肝病毒是一种古老的小型嗜肝DNA病毒，只有深入了解这种病毒结构，科研人员才可以掌握开发有针对性的医药技术。接下来，我们从HBV的结构、基因组和复制周期简要作个介绍。

了解乙肝结构特点，掌握HBV复制周期，是开发新靶点的基础

HBV的包膜是由脂质双层形成的，其中包含小、中和大尺寸乙肝表面抗原（S-HBsAg、M-HBsAg 和 L-HBsAg）嵌入为跨膜蛋白。包膜围绕着一个由120个核心蛋白（HBcAg）二聚体形成的核衣壳，它用来存储乙肝病毒基因组和聚合酶（HBV Pol）。乙肝病毒基因组，由3.2kb松弛环状DNA（rcDNA）分子组成。

它包含四个开放阅读框（ORF），分别为编码聚合酶（P）、表面（S）、前核心/核心（C）和X。乙肝病毒的复制和转录受到其调控元件控制，比如增强子、启动子（S1、S2、pre-core、core 和 X）；和衣壳化（ε）、聚腺苷酸化和复制信号。病毒基因组的一个重要特点是其ORF的重叠。重叠区域的缺失和非同义突变，会影响HBV基因型的进化和pre-S 结构域的分化（感染过程中的关键）。

乙肝病毒基因组的变异性，不仅是由病毒适应性和HBV Pol缺乏纠正活性驱动的，而且突变体也是由内源性（宿主免疫压力）和外源性（抗病毒药物和疫苗接种）因素施加压力导致的。全球已有发现pre-S1区域存在强选择，该区域和编码HBV Pol间隔区的核苷酸重叠，相对适应非同义突变。这些变体的积累为构象结构变化提供灵活性，并对免疫选择压力做出反应。

科研人员除了掌握HBV的主要结构还远远不够，还需要深入了解HBV的复制周期。乙肝病毒复制周期开始于L-HBsAg与牛磺胆酸钠转运多肽 (NTCP) 的结合，以介导病毒颗粒进入肝细胞。病毒被内吞并运输到细胞核，而病毒衣壳则被去包膜。

病毒基因组似乎通过核孔进入细胞核，被宿主因子修复并转化为共价闭合环状DNA（cccDNA）的形式。目前为止，科学家的共识是，这种复制中间体与宿主蛋白结合形成了病毒微染色体，作为病毒RNA转录的模板。生产出的五种病毒mRNA，包括前基因组RNA（pgRNA），它是乙肝病毒复制的主要中间体。

pgRNA被输出到细胞质中，它的5' 端与HBV Pol结合并诱导包装过程。随后在核衣壳内，pgRNA被病毒聚合酶逆转录成为新的rcDNA。又或者是形成双链线性DNA（dslDNA），并在HBVDNA整合到宿主基因组中发挥重要作用。成熟的衣壳，可以将rcDNA递送至细胞核中，增加cccDNA的含量，或者与内质网（ER）中的HBV表面蛋白结合，以病毒粒子的形式分泌到肝细胞外。

小番健康结语：我们都知道，目前全球HBV药物开发基本是针对HBV复制周期的，所以深入了解复制周期每一个步骤都是科研人员十分关心的课题。可以简要归纳目前全球科研人员已掌握的HBV复制周期过程即：

HBV通过NTCP进行内吞作用。在细胞内，rcDNA进入细胞核，在那里修复形成cccDNA。后者形成用于乙肝病毒RNA转录的病毒微染色体。pgRNA与胞质溶胶中HBV Pol结合以诱导包装过程，随后合成HBVDNA。新的病毒颗粒在ER中组装并易位，以病毒粒子的形成分泌到肝细胞外。