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核桃分心木黄酮物质的组分及其抗氧化性分析

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核桃分心木(Diaphragma juglandis fructus),名核桃隔膜,简称分心木,是胡桃科核桃属植物果核内部的木质隔膜,呈弯曲不规则的薄片状,且质地脆,一般是核桃总质量的5%左右,是新疆传统维吾尔族药物之一,具有利尿清热、健脾固肾、涩精等作用。核桃分心木用水煮沸后饮用,具有治疗肾虚遗精等功效。此外,长期喝分心木水泡物,对老年人的腰酸腿疼症状会有所缓解,并且有助于睡眠和提高免疫力。核桃分心木中含有丰富的活性成分,包括黄酮、有机酸、酚类、生物碱、油脂、皂苷、挥发油、氨基酸、鞣质、糖类、多肽和其他化合物。大量研究结果表明分心木中含有较高的黄酮类物质。

虽然很多研究学者对核桃分心木的化学成分进行了研究,但是对分心木黄酮物质的组分的系统性研究鲜见报道。 石河子大学食品学院的沙玉欢、毛晓英*、吴庆智等人 对核桃分心木黄酮物质进行分离纯化并对其组分进行组成分析,对其分离纯化组分进行抗氧化能力测定,以期鉴定出新的黄酮物质,同时进行黄酮物质含量与抗氧化性指标之间的相关性分析,并发现各种抗氧化指标和黄酮组分的关系。研究结果将为核桃分心木黄酮物质的组分抗氧化性及构效关系奠定基础。

1、黄酮标准曲线

由标准曲线法得到拟合方程为:Y=11.99X-0.005 7,R 2 =0.995 8,芦丁标准溶液在0.01~0.05 mg/mL范围内,呈良好的线性关系。

2、粗黄酮物质测定结果

得到的核桃分心木粗黄酮物质的质量分数为(7.76±1.023)%。这与赵娟娟研究结果相似,其在50%乙醇溶液、提取液料比1∶20.7、提取温度50.3 ℃、提取时间4 h的条件下,核桃分心木黄酮物质的质量分数为6.693%。

3、分离纯化洗脱曲线

由图1可知,分离纯化后收集到的黄酮物质质量浓度有明显差异。因此将第6~10管各收集为1 管,第11~15管合并收集,共收集6 管。

4、抗氧化能力测定结果

如表1所示,6 管样品中的ABTS阳离子自由基清除率、羟自由基清除率以及ROS自由基清除率出现高于VC阳性对照,原因可能与黄酮物质的组分有关,不同组分的黄酮物质之间的组合提高抗氧化能力。

5、高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法测定黄酮组分

结果可知,样品中除已知的柚皮素、异槲皮素、金丝桃苷、二氢槲皮素、儿茶素、槲皮苷外,还含有槲皮素、黄芪苷和表儿茶素没食子酸酯,这3 种黄酮物质首次在核桃分心木中发现并证实。如表3所示,柚皮苷含量与DPPH自由清除率和ABTS阳离子自由基清除率有显著负相关性,儿茶素含量与ROS清除率呈正相关。黄酮物质的自由基清除能力的大小与其供氢体、供氧质子等有关。这是由于具有B—4’—OH、B—3’—OH和A—7—OH,B环具有临位酚羟基,这些结构可以提供了供氢体和供氧质子,阻断自由基的链式反应,因此这类黄酮物质具有较高的抗氧化能力。

6、验证实验

如表4所示,槲皮苷的ABTS阳离子自由基清除率高于8 个标准品混合样(混样),高于阳性对照VC。而槲皮苷的羟自由基清除率和ROS自由基清除率略高于阳性对照VC和混样,差异不显著。通过验证实验发现,槲皮苷有很强的ABTS阳离子自由基清除能力。黄酮类化合物具有很强的抗氧化活性,其抗氧化活性与结构有着密切的关系,不同结构(如羟基数目及位置、羰基结构和糖苷键位置等)的黄酮类化合物,表现出不同的抗氧化能力。一般而言,体外和细胞抗氧化实验证实具有3’,4’-邻二羟基、C3—OH、C2=C3和C—4羰基构的黄酮化合物要比没有这些结构的黄酮物质的抗氧化能力强。图6是槲皮苷的分子结构式,槲皮苷具有3’,4’-邻二羟基、C2=C3和C—4羰基结构,因此槲皮苷具有很好的自由基清除能力的实验结果合理。

结 论

本研究对分心木黄酮物质进行提取及分离纯化,对分离纯化的核桃分心木黄酮物质进行收集,并对收集到的6 管样品进行组分分析以及6 种抗氧化指标的测定。组分分析发现除文献已报道的黄酮类物质柚皮素、芦丁、异槲皮素、金丝桃苷、二氢槲皮素、儿茶素、槲皮苷,没食子酸(属多酚)外,还含有槲皮素、黄芪苷、表儿茶素没食子酸酯,其中6 管样品中槲皮苷含量最多,芦丁与没食子酸含量最少甚至不存在。抗氧化能力测定结果与黄酮组分和含量相关性分析结果显示,柚皮苷含量与DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率呈现负相关,即柚皮素组分对DPPH自由基和ABTS阳离子自由基的清除活性较低,由于自身结构原因,可能反而产生促氧化的作用。儿茶素对ROS自由基有很好的清除效果,对DPPH自由基清除效果不好。并且槲皮苷有很强的ABTS阳离子自由基清除率。实验结果进一步证实了具有B—4’—OH、B—3’—OH和A—7—OH,B环具有临位酚羟基,3’,4’-邻二羟基、C3—OH、C2=C3和C—4羰基等结构可以提高黄酮化合物抗氧化活性。研究结果为柚皮苷、儿茶素和槲皮苷的抗氧化能力及其构效关系的研究奠定基础,也为核桃副产物的加工利用提供提供了理论依据。

本文《核桃分心木黄酮物质的组分及其抗氧化性分析》来源于《食品科学》2021年42卷12期91-98页,作者:沙玉欢,毛晓英,吴庆智,张建,程卫东。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20200423-304。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。

修改/编辑:袁艺;责任编辑:张睿梅

图片来源于文章原文及摄图网

为进一步促进动物源食品科学的发展,带动产业的技术创新,更好的保障人类身体健康和提高生活品质,北京食品科学研究院和中国食品杂志社在宁波和西宁成功召开前两届“动物源食品科学与人类健康国际研讨会”的基础上,将与郑州轻工业大学、河南农业大学、河南工业大学、河南科技学院、许昌学院于2021年9月18-19日在河南郑州共同举办“2021年动物源食品科学与人类健康国际研讨会”。欢迎相关专家、学者、企业家参加此次国际研讨会。

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