研究蛋白质,首先要得到高纯度的、具有生物学活性的、相对稳定的目的蛋白质,因此,高效的纯化技术和手段是蛋白质研究的重要基础和关键。以下几种是常用方式和对比:
图片来源: 丁香实验
不同纯化方式的特点不同,选择最适合的一套也很重要,比如:
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虽然蛋白纯化被认为是考验基本功的实验,但接踵而至的考验只会让原本不熟练的实验雪上加霜,导致纯化实验失败了一次又一次……
失败原因五花八门,比如:标签蛋白纯不出来,过了分子筛跑 SDS 胶还一堆杂带?面对着样品的精细分离,却不会选层析柱?纯化得到的组分中没有或只有少量目的 His 标签蛋白,知道了蛋白等电点却不知如何选择离子交换层析......
丁香实验推出「蛋白质纯化专题」帮大家解决实验中常见问题:
1、凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式
2、凝胶过滤层析的三大应用种类
3、使用凝胶过滤进行样品的精细分离时,应该这样选择层析柱
4、纯化实验中常用的亲和标签汇总
5、纯化得到的组分中没有或很少目的 His 标签蛋白的主要原因分析
6、抗体的亲和纯化的常见方式
7、已知蛋白等电点,离子交换层析的选择建议
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策划制作
策划:Olaf
配图:丁香实验设计团队
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