鲜牛奶体细胞数的常用检测方法

牛奶体细胞数的英文为somatic cell count,SCC。牛奶体细胞数是指每毫升牛奶中的细胞总数，多数是白细胞，通常由巨噬细胞、淋巴细胞、多形核嗜中性白细胞和少量乳腺组织上皮细胞等组成，约占牛体细胞数的95%，其余是乳腺组织死去脱落的上皮细胞。体细胞数反映了牛奶质量及奶牛的健康状况,在正常情况下,牛奶中体细胞数一般在2万～20万个/mL。

衡量奶牛生理健康状况的重要指标,高体细胞数直接指证奶牛的乳腺患有炎症性疾病。患炎症奶牛所产的牛乳不仅营养成分含量偏低,而且人们误饮后甚至会引发群体性食物中毒,直接威胁饮用者的安全和健康。对牛乳体细胞数进行检测,可以及时发现有炎症的奶牛,进而从源头上保障牛乳的品质。介绍了关于牛乳体细胞数的主要检测方法,并对这些方法的特点进行了分类汇总,进而对这些方法的发展和应用进行了总结和展望。

常用检测方法

产品介绍

为了等待牛奶样品的检查结果，一头奶牛的牛奶不能进入奶罐，会让您损失多少钱？同时，为了分析奶样，你又花费了多少钱？

RT10体细胞检测仪 ， 能让您在几秒钟获得牛奶的体细胞数！ 仅需配备：

1. iphone或iphod

2. RT10检测仪

3. 样品条

4. 应用软件Dairy ipod5兼容 。

产品特点

即时结果，可以检测单头奶牛、单个乳 区、奶罐奶的体细胞数图像分析，根据不同体细胞的形态分析 导致体细胞数升高的病原菌数据储存，可对图像、结果或记录进行 自动保存，以供将来参考提高你的独立性，更好的控制牛群的健 康状况

检测范围可达1-600万/ml，检测样品不需调配，不 需要稀释，预热效果更加，检测时间30秒，检测精度与 DHI.DCC.SCC-100吻合率95%以上。

产品应用

Dairy SCC应用软件通过对视野里的细胞进行技术和分析，就会得出牛奶中的体细胞数。牛场技术人员不仅检测了体细胞 数，还看到了体细胞的真实图像。

根据图像的特征， 该设备还会对可能导致细胞数升高的病 原菌进行分析，给兽医师提供相关的治疗依据。

1）显微镜细胞计数法。

人工显微镜计数法是一种直接检测法，是指鲜牛乳样品直接滴加在载玻片上使用显微镜观察，并由人工计算所含的体细胞。鲜牛乳采取该法检测体细胞的步骤是：先配置染色液，即取40　mL四氯乙烷和54　mL乙醇，充分摇晃均匀，然后放在65℃的温水溶液中进行3　min加热，再添加0.6　g甲基兰，混合均匀后置于4℃冰箱，在温度达到4℃时再添加6　mL冰醋酸，放在常温条件下保存；取一片干净的载玻片，划分成4个小方格，每格面积为1　cm2，然后用微量注射器吸取10　μL生鲜牛乳样品注射到1　cm2的载玻片上，平放在恒温箱中，干燥后浸在染色液，后形成均匀玻片；放在300～500倍显微镜下对玻片上的染色细胞进行观察，按照一定的准则计算体细胞数量。一般按照“数上不数下，数左不数右”的计数规则进行计数，防止出现遗漏和重复。尽管该法使用设备简单，容易在实验室外操作，但整个操作过于繁琐，具有较大的工作量，特别是在计数时容易出错。在人工显微镜计数法的基础上，通过改进发明荧光显微镜计数法，即使用特殊的缓冲液或染液对鲜牛乳样品进行处理，再使用安装相应滤色镜的荧光显微镜进行计数。一般来说，鲜牛乳中的蛋白质不会形成荧光，不会影响测定，脂肪球会形成黄绿色的荧光，使用相应的滤色镜能够挡住，只有体细胞形成的红色荧光能够看见，从而能够更好地使荧光细胞同周围背景进行区别，能够有效提高计数的准确率。

2）加利福尼亚细胞数测定法（CMT法）

是一种间接检测法，其原理是鲜牛乳中的体细胞接触表面活性试剂，如溴甲酚红紫、烷基芒硫酸盐、烷基芳基磺酸或者氢氧化钠等，能够使细胞收缩凝固，同时释放脱氧核糖核酸，并发生凝聚，含有越多的体细胞，凝聚状态则会越强，形成越多的凝聚块，对这些凝聚块统计就能够估算体细胞的数量。该法所需设备少，操作简单，检测速度快，灵敏度高，价格便宜，结果比较准确，且同直接镜检细胞计数法、过氧化氢酶活性等也具有较好的关联性，且受环境温度影响较小，样品中即使混杂有毛发等外源物质也不会对结果产生影响，适合对个体奶牛或者总奶样进行检验；缺点是只能够得到体细胞的相对数量，比较容易受到人为因素影响，必须经过专门培训的人员才能够进行该项检查。另外，该法有时会出现假阳性结果，如鲜牛乳不新鲜或者泌乳末期的乳汁等，建议是检测泌乳量中期的牛乳。牛乳感染细菌后能够产生的毒素，导致体细胞被破坏，会使临床乳腺炎阳性的牛乳呈阴性。

3）pH值检测法。

该法是一种间接检测法，由于奶牛乳房发炎后所分泌的乳汁pH值同体细胞间存在一定的关联性，从而可经由测定牛乳样品的pH值来判断所含体细胞的数量。检测时，先用一次性培养皿取2　mL左右的鲜牛乳样品，并滴加相同剂量的诊断液，按照同心圆方式对培养皿进行摇动，在30～60　s之间就能够判断结果。当测地的牛乳pH值处于6.　4～6.6之间，判断每毫升的牛乳中含有0～20万个体细胞；pH值处于6.6～6.8之间，判断每毫升含有20万～50万个体细胞；pH值位于6.8～7.0之间，判断每毫升含有50万～150万个体细胞；pH值位于7．O～7.2之间，判断每毫升含有150万～500万个体细胞；pH值超过7.2，判断每毫升含有500万个以上的体细胞。该法操作简单，但是检测结果有时不太准确，还需要配合进行显微镜检测才能获得比较准确的结论。