C3H/HeJ品系小鼠发生内毒素耐受现象的原因

C3H/HeJ小鼠细胞Ran（或L.ps/Ran）发生点突变可使其功能缺陷，因而可以解释C3H/HeJ品系小鼠为何发生内毒素耐受现象。依据有以下四点：①C3H/HeJ小鼠的Lpsd/Ran cDNA 的3'端非翻译区（untranslated region）发生点突变，在870位点上胸腺密啶突变为胞密啶，但编码的蛋白质相同。②Lps/Ran基因作图分析得出：Lps/Ran基因位于C3H/HeJ品系小鼠第4号染色体上，也在传统的Lps基因位点区域内。③导入Lpsn/Ran cDNA可以恢复Lpsd/Ran的B细胞对内毒素的反应，但不能恢复对巨噬细胞的效应，即内毒素耐受反应在B细胞中消失；而导入Lpsd/Ran cDNA无类似现象。④使用腺病毒载体将Lpsd/Ran cDNA转移到敏感小鼠体细胞内﹐能使敏感小鼠对内毒素反应发生耐受，表型类似于C3H/HeJ品系的小鼠；而转入Lpsn/Ran cDNA无内毒素耐受现象。由此可见，Lps/Ran在某个环节也参与了内毒素信号转导效应。

使用功能性cDNA表达克隆方法和C3H/HeJ的B淋巴细胞作为检验细胞，Wong等分离出Lpsn/Ran的cDNA，并编码Ran/TC4 GTPase，其上游非翻译区的870位点处由胞嘧啶取代其胸腺嘧啶，结果引起mRNA结构出现显著改变。LpsdRan的cDNA表达在体内对内毒素敏感小鼠有抗休克保护反应，这是由于受到刺激的巨噬细胞所分泌的TNF-α，IL-1表达下调，两种Lpsn/Ran和 LpsdRan的 mRNA 的稳定性不存在差异，起初其蛋白质总量类似，但是在稳定的状态时，原代培养的巨噬细胞和B细胞中的Lpsd/Ran是Lpsn/Ran总量的5～10倍，两种蛋白质均可以从细胞质迁移到细胞核内，但Lpsn/Ran迁移的速度比Lpsd/Ran要慢。

在稳定状态时，尽管两种蛋白质是完全相同的，但Lpsn/Ran的总量却下降，由于两种mRNA 的结构不同，可能mRNA在细胞内定位存在着差异。更多的Lpsd/RanGTPase积聚在细胞核内，确信能够改变信号转导的效力，所以出现LPS介导的信号转导的下调性生物学效应。因此，Lps/Ran是LPS介导的信号转导的重要靶位，Lpsd/Ran cDNA可能在基因治疗休克方面有益。

可以想像，LPS通过酶学级联反应激活多个转录因子，但这些转录因子需要转位入细胞核内，方可以与基因的调控序列结合，并发挥其效应。而这些分子均为大分子物质，需要通过核孔复合物参与，即Ran等参与，而Ran蛋白质表达的量又直接影响转录因子入核的效率和数量；同时，在基因转录成mRNA时，也需要转出到细胞质，才可以翻译蛋白质，如TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、NO等，如果在mRNA转出时出现障碍，势必影响细胞因子的表达，若炎症因子表达低下，则其表型对内毒素耐受，类似于TLR4突变的表型。所以，有理由认为可以通过转染突变型Ran到宿主细胞内来促使巨噬细胞对内毒素产生耐受，以减少细胞因子的分泌，并降低内毒素血症等败血症的病死率。

机体的调节也包括内毒素耐受的发生和吞噬细胞对GNB和内化功能的增强。这些因素对内毒素的信号转导效应产生负性调节作用。