豚鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA试剂盒

酶联吸附法（ELISA）是一种灵敏、特异的学技术，常用于医学、生物领域中的抗原或检测。其使用范围包括：1.临床诊断：ELISA可以用于检测传染病（如、等）、标志物等，协助进行诊断。2.食品安全：ELISA可以用于检测食品中的有害（如残留、兽药残留等），保障食品安全。3.监测：ELISA可以用于评估水质、空气等指标，监测状况。4.生物分子检测：ELISA可以用于检测生物分子，如蛋白质、多肽、等，在生物医学研究领域广泛应用。总之，酶联吸附法在医学、生物领域中具有广泛的应用价值，是临床诊断和中重要的辅助手段。

ELISA试剂盒用法

ELISA试剂盒的用法包括以下步骤：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤：弃包被液（拍干，再用无尘纸吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次（每孔均要加满），每次3min~5min。3.封闭：每孔加封闭液（1%BSA）250μl，37℃封闭2h。4.洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。5.加样：加入已经稀释好的样品，37℃反应1h。一般样本加入50-100μl，充分混匀。6.洗涤：用洗涤液洗板3次，每次3min~5min。7.加入酶标试剂：每孔加入100μl酶标溶液，37℃，1h。8.洗涤：用洗涤液洗板3次，每次3min~5min。9.显色：每孔先加入显色剂A液50μl，再加入显色剂B液50μl，37℃避光10-15min。10.终止及测定：加入50μl终止液，终止反应，用酶标仪在450nm波长处测OD值。

双夹心 本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病（IBDV）的双夹心ELISA为例介绍本法的操作程序。 ① 加包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干 ② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干 ③ 加酶标 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干 ④ 加底物液　→ 37℃ 15分钟，加终止液 ⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。 双夹心ELISA 此法与双夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种，还可试验的性。此法的基本程序为： ① 加（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干 ② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干 ③ 加用非同种动物生产的特（Ab-2)→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干 ④ 加入酶标抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干 ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液 ⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。 竞争ELISA 此法主要用于测定小分子抗原及半抗原，其原理类似于放射测定。其基本程序为： ① 包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干 ② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干 ③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液 ④ 用ELISA检测仪测定OD值。

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