如何选择质粒DNA转染试剂

质粒DNA转染技术作为一种重要的实验手段，在基因表达研究、基因敲除研究、基因治疗、细胞药物递送等生命科学研究中的应用已经越来越广泛。那么，如何选择出一款理想的质粒DNA转染试剂呢？首先要考量其转染性能，这是最重要的一方面；其次还要考虑到实验的操作简便性，最好无换液之苦并且不需要购买额外的培养基；最后，对于实验者来说，性价比也是十分重要的衡量标准。能满足以上条件的质粒DNA转染试剂，同时，无论是对于经验不足的“小白”还是转染实验的“高手”；无论是易转的细胞系还是难转的细胞系，都有不错的转染效率，这样才能成为一款实验室常备的质粒转染试剂。

根据我们实验室的使用经验，Lipofect 5000就是一种高性能通用型、性价比高的核酸转染试剂，它适用于将质粒DNA转染入哺乳动物细胞。该款试剂具有以下几个方面的特点：

一、转染性能优异

转染性能是实验者最看重的一方面，也是直接评价一款转染试剂优劣的首要标准。符合通用型特点的质粒DNA转染试剂，不仅要能够对已经建立的简单细胞系进行有效转染，对于难转染的细胞也要有比较不错的转染效率。

一般情况下，在验证一个质粒转染试剂性能时，通常会用Hela细胞做体外质控，我们利用Lipofect 5000转染GFP质粒到Hela细胞，结果显示，转染阳性率可达90%（图1）。

另外，和lipo2000这种国际权威试剂相比，转染效率也不相上下。如图所示，将lipo2000和Lipofect 5000分别转GFP质粒到AGS细胞（人胃腺癌细胞），24h在荧光显微下观察转染阳性率，Lipofect 5000的转染效率高达90%，可完全媲美lipo2000的转染效果。

除了以上这些较为好转的贴壁细胞，对于难以转染的RAW264.7这类悬浮细胞，Lipofect 5000也能获得较好的转染效果（如图2）。这其实是非常难得的，因为RAW264.7细胞本身对质粒转染试剂的亲和力就比较弱，即使是权威品牌Lipo3000也很难做到对这种细胞的高效转染，这一实验结果也能充分证明了Lipofect 5000的转染性能。

二、操作简便

Lipofect 5000在转染实验的操作上也非常简便。一般的质粒转染试剂在配制转染复合物时需要实验者额外购买特殊培养基，如lipo2000、lipo3000需要搭配Opti-MEM减血清培养基一起使用。但Lipofect 5000转染试剂中自配了专业的Trans Buffer，可完全替代无血清培养基，减轻实验者额外花费的同时做到了与细胞亲和力更高，转染效果更稳定。

此外，由于Lipofect 5000毒性低，对细胞作用温和，转染后细胞死亡率不到10%，因此实验者在转染4-6h后不需要更换培养液，并且血清对转染效果没有影响，给实验者省去了等待换液的苦恼。

三、性价比高

从上述看来，Lipofect 5000不仅能有效转染贴壁细胞，对于难以转染的悬浮胞也有很好的转染效果。在通用型DNA转染试剂中，Lipofect 5000的价格也十分友好，售价不足国际权威品牌lipo2000的30%，具有很高的性价比优势，是目前很多实验室的常备质粒转染试剂。