斑马鱼行为篇（68）：斑马鱼高脂血症模型

斑马鱼（Zebrafish）由于其生殖周期短、成本低廉、易于饲养和操作，以及与人类基因的高度同源性，已成为研究高脂血症（Hyperlipidemia）和其他心血管疾病的重要模型生物。利用已建立的高脂血症模型进行药物筛选，研究潜在的治疗高脂血症的药物或化合物。斑马鱼高脂血症模型为研究脂质代谢紊乱的分子机制、疾病发展过程以及新药开发提供了一个强有力的实验平台。

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斑马鱼高脂血症模型

• 饲料诱导模型

将普通斑马鱼幼鱼饲料浸没于溶解有一定量胆固醇的无水乙醚中，充分搅拌至乙醚完全挥发，使胆固醇附于普通饲料上，制备成含 4% (w /w)的高胆固醇饲料。斑马鱼给予高胆固醇饲料10天后，幼鱼血管中胆固醇水平极显著升高。

使用高脂饲料（含高脂肪、高胆固醇）长期喂养斑马鱼，诱导其出现高脂血症症状。定期监测斑马鱼的血脂水平，包括甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）等指标。

动物分组及干预

将受精5d后的斑马鱼胚胎随机分为以下7组，空白对照组、模型组、给药组，每组30条。其中，空白对照组:5～18dpf喂普通饲料(草履虫)。模型组:5～15dpf喂高脂饲料，3次/d;16～18dpf普通饲料喂养3d。

基因编辑技术

可利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术敲除或敲入斑马鱼中与脂质代谢相关或感兴趣的基因，构建高脂血症模型。

• 药物诱导模型

使用已知可诱导高脂血症的药物，如甲状腺激素或某些类固醇，来处理斑马鱼。

环境因素影响

研究环境因素，如温度、pH值、水质等对斑马鱼血脂水平的影响。

行为和生理监测

观察斑马鱼的行为变化，如活动性、摄食行为等，以及生理指标，如心脏功能、血管健康状况等。对斑马鱼进行组织切片和染色，观察其内脏器官，特别是肝脏和心血管系统的病理变化。各组随机选取10条斑马鱼，用含0.05%三卡因的1%甲基纤维素溶液固定后运用荧光显微镜拍照。油红O染色检测高脂血症模型斑马鱼脂质沉积的影响。利用qPCR、Western blot等方法分析与脂质代谢相关的基因和蛋白的表达变化。

每组随机挑选10尾斑马鱼置于心跳血流分析系统下录制斑马鱼血流视频，分析斑马鱼血流速度，以血流速度的统计学分析结果评价药物对斑马鱼血流速度的改善作用。

参考文献：

• Stoletov K，Fang L，Choi SH，et al． Vascular lipid accumulation，lipoprotein oxidation，and macrophage lipid uptake in hypercholesterolemic zebrafish［J］． Circ Ｒes，2009，104: 952960

• Utilization of zebrafish for intravital study of eukaryotic pathogen–host interactions[J]. Remi L. Gratacap;;Robert T. Wheeler.Developmental and Comparative Immunology,2014

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