南京博研生物：小鼠白细胞介素6 ELISA试剂盒详解

南京博研生物科技有限公司（Byabscience）的小鼠白细胞介素6 (IL-6) ELISA试剂盒是一种高灵敏度和高特异性的试剂盒，用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液等样本中的IL-6含量。以下是该试剂盒的详细说明书：

产品名称

小鼠白细胞介素6 (IL-6) ELISA试剂盒

检测原理

该试剂盒采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）进行定量检测。具体步骤如下：

1. 捕获抗体：预先包被在微孔板上的特异性捕获抗体能够特异性地结合样本中的小鼠IL-6。
2. 样本孵育：将待测样本加入微孔板中，样本中的IL-6会与捕获抗体结合。
3. 洗涤：去除未结合的物质。
4. 检测抗体：加入酶标记的特异性检测抗体，该抗体能够特异性地结合已经固定在微孔板上的IL-6。
5. 再次洗涤：去除未结合的检测抗体。
6. 底物显色：加入底物溶液，酶标记的检测抗体催化底物产生颜色反应。
7. 终止反应：加入终止液停止显色反应。
8. 读数：使用酶标仪在450 nm波长下读取吸光度值。

产品规格

• 规格：96T/48T
• 保存条件：2-8°C
• 有效期：6个月

组成成分

• 预包被微孔板：96孔或48孔
• 标准品：6个浓度
• 酶标记抗体：浓缩液
• 样本稀释液：用于稀释样本
• 洗涤缓冲液：10倍浓缩液
• 底物溶液：TMB
• 终止液：2M H2SO4
• 封板膜：用于封板
• 说明书：详细的操作步骤和注意事项

操作步骤

1. 准备样本：根据需要稀释样本。
2. 加样：将样本和标准品分别加入预包被的微孔板中，每孔100 μL。
3. 孵育：室温下孵育2小时。
4. 洗涤：弃去孔内液体，用洗涤缓冲液洗涤3次，每次30秒，最后拍干。
5. 加酶标抗体：每孔加入100 μL酶标抗体，室温下孵育1小时。
6. 再次洗涤：同上。
7. 加底物液：每孔加入100 μL底物液，室温下避光孵育15分钟。
8. 加终止液：每孔加入50 μL终止液，终止反应。
9. 读数：使用酶标仪在450 nm波长下读取吸光度值。

结果计算

• 标准曲线：根据标准品的吸光度值绘制标准曲线。
• 样本浓度：根据标准曲线计算样本中的IL-6浓度。

注意事项

• 试剂准备：所有试剂在使用前需恢复至室温。
• 避免污染：操作过程中注意避免交叉污染。
• 洗涤：充分洗涤是保证实验结果准确的关键步骤。
• 储存：未使用的试剂应按说明书要求保存。

储存和运输

• 储存条件：2-8°C
• 运输条件：配生物冰袋运输