斑马鱼行为篇（107）：斑马鱼放射性脑损伤模型

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了解放射性损伤对斑马鱼神经系统的具体影响，有助于评估潜在药物对放射性脑损伤修复的促进作用，为新药开发提供实验依据。

选择健康的野生型或转基因斑马鱼胚胎，将斑马鱼胚胎置于适宜的温度（28.5°C）和培养基中培养至所需的发育阶段（通常为24-72小时后孵化）。斑马鱼照射技术80只成年斑马鱼随机分配到对照组与照射组，将斑马鱼幼鱼置于放射源下，进行一定剂量的照射，剂量采用单次头部20Gy。设置对照组，不进行放射性照射。照射时斑马鱼用0.01%MS⁃222麻醉，利用VARIAN2300EX直线加速器，使用 6MVX线，源皮距100cm。

放射性脑损伤后行为评估：

通过观察斑马鱼的行为变化来评估放射性脑损伤的影响。可以记录斑马鱼的活动能力、社交行为、学习能力和记忆能力的变化。社交偏好测试和迷宫学习测试，以评估斑马鱼在放射性脑损伤后的行为和认知功能变化。计算并比较放射性损伤组和对照组的各行为指标。

Tunel法检测脑组织凋亡细胞制作脑组织石蜡切片，进行Tunnel染色，可评估细胞凋亡情况。

1. 旷场测试（Open Field Test）：

使用一个方形或圆形的开放场，尺寸约为20 cm × 20 cm，将斑马鱼放入开放场中央。观察并记录斑马鱼在开放场中的活动，如总活动距离、中心区域活动时间和边缘区域活动时间。使用视频记录设备记录斑马鱼的行为，以便后续分析。

行为指标：

• 总活动距离：斑马鱼在开放场中的总移动距离。

• 中心区域活动时间：斑马鱼在旷场中心区域的停留时间。

• 边缘区域活动时间：斑马鱼在旷场边缘区域的停留时间。

2. 水迷宫测试（Water Maze Test）：

使用一个圆形水迷宫，直径约为60 cm，水深约为5 cm。在水迷宫中设置一个目标区域（通常是平台或特定区域）。将斑马鱼放入水迷宫中，记录其找到目标区域的时间。进行多次测试，记录斑马鱼的学习和记忆能力。

行为指标：

• 找到目标区域的时间：斑马鱼找到目标区域所需的时间。

• 路径长度：斑马鱼从起点到目标区域的路径长度。

• 游泳速度：斑马鱼的平均游泳速度。

3. 社交偏好测试（Social Preference Test）：

使用一个三室水箱，中间为测试室，两侧分别为社交室和空室。将一只斑马鱼放入测试室，另一只斑马鱼放入社交室，观察并记录斑马鱼在社交室和空室的停留时间。

行为指标：

• 社交室停留时间：斑马鱼在社交室的停留时间。

• 空室停留时间：斑马鱼在空室的停留时间。

参考文献：

• PraveenKumarMK，Shyama SK，Kashif S，et al. Effects of gamma radiationon the earlydevelopmental stages of Zebrafish （Danio rerio）［J］.EcotoxicolEnvironSaf，2017，142：95-101

• 廖桂祥,龚龙,杨东,等.成年斑马鱼放射性脑损伤模型的建立[J].热带医学杂志,2020,20(08):1009-1012.

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