复方1区Top: 同济医院揭示补肾活血方促进POI小鼠BMSCs增殖和归巢改善卵巢功能

【写在前面】：本期推荐的是由华中科技大学同济医学院同济医院中西医结合研究所、华中科技大学同济医学院同济医院等研究团队合作近期发表于Phytomedicine(IF6.7）的一篇文章，揭示补肾活血方通过促进POI小鼠骨髓间充质干细胞增殖和卵巢归巢改善卵巢功能。

【期刊简介】

【题目及作者信息】

Bushen Huoxue recipe ameliorates ovarian function via promoting BMSCs proliferation and homing to ovaries in POI mice

背景

卵巢早衰（POI）是女性生殖医学领域的一个棘手难题。补肾活血方（BHR）是一种以补肾活血为基础的中药复方，在改善女性月经不调、POI和不孕方面显示出优异的疗效。然而，BHR在POI治疗中的潜在机制尚未阐明。骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一种多能干细胞，因其在改善卵巢功能和恢复POI女性生育能力方面的重要作用而受到越来越多的关注。

目的

本研究旨在评估BHR对POI小鼠的治疗效果，并探讨其潜在机制。

方法

通过单次腹腔注射120mg/kg环磷酰胺（CTX）建立POI小鼠模型。连续28天通过强饲法给予蒸馏水、BHR或脱氢表雄酮。通过评估动情周期、卵巢形态、卵泡发育、激素水平和血管生成，评估BHR对POI小鼠卵巢功能的影响。通过流式细胞术分析骨髓、外周血和卵巢中BMSCs的比例，并测量介导卵巢迁移和归巢的分子水平。通过细胞活力测定、划痕愈合测定和经孔迁移测定，探讨BHR对BMSCs体外增殖和迁移的影响，并探讨其潜在机制。

结果

BHR显著改善了POI小鼠的动情周期紊乱、激素紊乱、卵巢形态、卵巢微血管形成和卵巢储备。同时，骨髓、外周血和卵巢中的BMSCs数量明显增加。值得注意的是，BHR增加了POI小鼠卵巢中肝细胞生长因子（HGF）/细胞间充质上皮转化因子（cMET）和基质细胞衍生因子-1（SDF-1）/CXC趋化因子受体4（CXCR4）的水平。此外，BHR治疗促进了BMSCs在体外的增殖和迁移，增殖细胞核抗原、cMET和CXCR4的水平显著升高。

结论

BHR有效地恢复了CTX诱导的POI小鼠的卵巢储备、卵巢功能和卵巢血管生成。此外，BHR促进BMSCs增殖、迁移和归巢到卵巢，这是由SDF-1/CXCR4和HGF/cMET信号轴介导的。最后，BHR改善CTX诱导的POI小鼠卵巢储备和卵巢功能可能与促进内源性BMSCs增殖和归巢有关。

图文摘要

【前言】

卵巢早衰（POI），也称为卵巢早衰，是指女性在40岁之前卵巢功能丧失。荟萃分析估计，POI影响了全球约3.5%的女性。POI可能导致不孕、泌尿生殖系统萎缩和骨质疏松症，以及心血管疾病和神经退行性疾病风险增加。因此，它会显著影响患者的生活质量。

根据中医理论，POI的症状包括月经不调、痛经、闭经和不孕，POI的发病机制与肾虚血瘀有关。因此，补肾活血疗法被广泛用于改善POI，这一策略可以追溯到战国时期的《黄帝内经》（公元前722-221年）。临床和实验研究表明，补肾活血疗法能有效缓解POI症状，调节血清激素水平，改善卵巢储备和卵巢功能。这些机制可能与减轻氧化应激、调节转化生长因子β1和Smad 2/3信号通路以及调节免疫反应有关，从而表明中药复方在调节多种途径、环节和靶点方面的优势。补肾活血方（BHR）是一种中草药，具有补肾活血的功效，已被证明在临床上对POI安全有益。先前的研究表明，BHR治疗可以有效恢复化疗诱导的POI小鼠的卵巢储备，改善卵巢功能。同样，Song等人提出，BHR通过恢复骨髓中的种系干细胞功能障碍来发挥作用，从而改善新卵子生成。然而，其潜在机制尚未完全阐明。

【结果部分】

1.LC-MS/MS分析BHR样品的基峰离子色谱图。

UHPLC-MS/MS用于鉴定BHR样品的化学成分。BHR在负离子和正离子模式下的总离子色谱图如图1所示。BHR样品中共含有944种化学成分，主要由萜类、黄酮类、酚类、生物碱、芳香性、苯丙烷类、脂肪酰基、木脂素、环烯醚萜类和醌类组成。值得注意的化合物包括芍药苷、马鞭草苷、没食子酸、山奈酚、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、黄芪甲苷IV、senkyunolide A、马钱苷和阿魏酸（补充材料表1、表2）。

2.BHR改善POI小鼠的动情周期、卵巢和体重。

3.BHR对卵巢形态改变、卵泡发育和血清激素水平的影响。

4.BHR改善POI小鼠卵巢血管生成。

5.BHR对POI小鼠骨髓、外周血和卵巢中BMSCs百分比的影响。

6.BHR对POI小鼠卵巢HGF/cMET和SDF-1/CXCR4表达的影响。

7.BHR在体外促进BMSCs增殖。

8.BHR在体外促进BMSCs迁移。

9.BHR对CTX诱导的POI小鼠的作用和机制的示意图。

BHR有效地恢复了CTX诱导的POI小鼠的卵巢储备、卵巢功能和卵巢血管生成。此外，BHR促进BMSCs增殖、迁移和归巢到卵巢，这是由SDF-1/CXCR4和HGF/cMET信号轴介导的。最后，BHR改善CTX诱导的POI小鼠卵巢储备和卵巢功能可能与促进内源性BMSCs增殖和归巢有关。

【结论与讨论】

综上所述，目前的研究结果表明，BHR在几个POI相关方面发挥了至关重要的作用。首先，它抑制卵泡闭锁，促进卵泡生长，改善内分泌紊乱，恢复卵巢储备。其次，它调节VEGF和bFGF的表达，促进卵巢血管生成。最后，它促进了BMSCs的增殖、迁移和归巢到卵巢，这可能与SDF-1/CXCR4和HGF/cMET信号轴有关（图9）。然而，BHR对CTX诱导的POI小鼠卵巢储备和卵巢功能的改善作用是否与其促进内源性BMSCs增殖和迁移有关，需要进一步研究。BHR和BMSCs在改善POI方面的微妙联系表明，肾脏控制骨骼和骨髓生成以及肾脏控制生殖的中医理论可能是相互联系的，这可能为探索中医理论的科学性奠定基础。

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