斑马鱼行为篇（112）：斑马鱼抑制性避免测试

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斑马鱼的抑制性避免测试（Inhibitory Avoidance Test，简称IAT）是一种用来评估学习和记忆能力的行为测试方法。这种测试特别适用于研究斑马鱼的认知功能，尤其是在药理学和毒理学研究中。可评估斑马鱼对先前经历的厌恶刺激的记忆保持能力以及斑马鱼通过负面经验进行学习的能力。IAT是研究认知功能，特别是记忆和学习机制的重要工具。

实验步骤：

使用一个双室水槽，通常由一个可移动的隔断分为两部分。每个室可以通过颜色、光线或其他视觉提示进行区分。水槽的两边可能被涂上不同的颜色或置于不同的光照条件下，以形成明显的视觉区分。非条件刺激（US）：可以是奖赏性的，如食物；或厌恶性的，如电击。条件刺激（CS）：通常与非条件刺激配对，如将暗室与电击配对。

训练阶段：

斑马鱼被放置在明亮的一侧。

鱼被允许游到暗室，一旦进入暗室，就会接收到电击（或其他厌恶刺激）。

重复训练：

训练阶段可以重复多次，以加强条件反射的形成。

探测阶段：

在最后一次训练后24小时进行，以测试短期记忆。

移除隔断，允许斑马鱼自由访问两个室，但不施加电击。

记录鱼进入暗室的潜伏期，此潜伏期越长，表明记忆保持能力越好。

参数记录：

潜伏期：鱼从明亮室游到暗室的时间。

进入次数：鱼进入暗室的次数。

游动距离：在暗室内鱼游动的距离。

IAT测试可以使用双室水槽和各种形状的迷宫水槽建立。在双室水槽中，水槽/迷宫的两侧用彩色套管或暗亮环境作为提示，而选择其中一侧将提示与不利刺激配对，例如电击（ES）、掉落重物或搅动。在IAT中，通常选择有利的一侧（通常是暗室）进行条件刺激（CS）与非条件刺激（US）的配对。在训练阶段，斑马鱼被放置在明亮的一侧，并允许其游到暗室。当鱼进入暗室时，会施加电击。训练阶段可以重复数次，直到形成条件反射。然后在最后一次训练试验后24小时（用于短期记忆）进行探测阶段，让鱼在没有电击的情况下探索水槽。记录训练和探测阶段进入暗室的潜伏期，作为记忆保持的指标。可以使用软件测量其他参数，如进入暗室的次数和在暗室内游动的距离。

双室水槽使用颜色编码作为视觉提示，例如。非条件刺激可以是奖赏性的，比如食物奖励，或者是厌恶性的，比如电击。

可使用一个双室或多室的水槽，确保各个室之间有明显的区分，如颜色、光线或物理隔断。为斑马鱼提供清晰的视觉提示，帮助它们区分不同的区域，例如使用不同颜色的套管或底垫。非条件刺激（US）应该是强烈的、一致的，并且对鱼来说是容易识别的，如电击、温度变化或掉落重物。条件刺激（CS）应该是与US配对的，如暗室或特定颜色的光照。训练阶段应该足够长，以确保鱼能够学会将CS与US联系起来。训练强度和次数应根据实验目的进行调整。在最后一次训练后，应有足够的时间间隔进行探测阶段，以测试记忆保持，通常是24小时后进行短期记忆测试。记录进入“危险”室的潜伏期，这是评估记忆保持的主要参数，同时记录进入次数和在“危险”室中游动的距离。

注意事项：

确保所有鱼在实验前都经过相同的处理，以减少变异性。实验过程中水温、pH值和溶解氧等水质参数应保持恒定。

参考文献：

Tan JK, Nazar FH, Makpol S, Teoh SL. Zebrafish: A Pharmacological Model for Learning and Memory Research. Molecules. 2022 Oct 30;27(21):7374.

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